Μεθοδος

Αντιπηκτικό

Αναγκαιότητα

Ανοσοφαινότυπος

EDTA/Heparin

Υποχρεωτικός

Καρυοτυπική Ανάλυση

Heparin

Υποχρεωτική

FISH

EDTA

Όχι

Μοριακές

EDTA/Heparin

Υποχρεωτικές

 T-LGL

Ανοσοφαινότυπος

Πληθυσμός >500 T-LGL/μL ή και >15% επί των λεμφοκυττάρων συνιστάται να μελετάται περαιτέρω.

Η πλειονότητα των LGL λευχαιμιών είναι CD8+ (έχουν περιγραφεί και σπάνιες CD4+ περιπτώσεις) και τυπικά συνεκφράζουν CD2, CD3, CD16 και CD57 (ειδικός δείκτης των LGL). Απώλεια έκφρασης ή ασθενής έκφραση των CD5 και CD7 ανευρίσκεται πιο συχνά και βοηθά στον προσδιορισμό πιθανών κλωνικών εξεργασιών, αλλά η απώλεια αντιγόνων δεν είναι καθολική. Η παρουσία του CD16 είναι σημαντική, καθώς δεν εκφράζεται στα φυσιολογικά Τ-λεμφοκύτταρα: CD16+ πληθυσμός σε ποσοστό  >30% των Τ λεμφοκυττάρων είναι ενδεικτικός κλωνικής διαταραχής.

Η μελέτη των TRBC1 και TRBC2 υποδεικνύει την μονοτυπικότητα του ύποπτου πληθυσμού, εφόσον αυτός είναι TCRαβ+. Σε περίπτωση TCRγδ πληθυσμού συνιστάται επιβεβαίωση με μοριακές τεχνικές.

Μοριακή γενετική

TCRβ ή TCRγ

HSTL

Ανοσοφαινότυπος

Τα κύτταρα είναι συνήθως θετικά για το CD3, έναν παν-Τ δείκτη, επιβεβαιώνοντας την Τ-κυτταρική σειρά.

Διπλά αρντηικά (CD4-/CD8-): Σε αντίθεση με τα φυσιολογικά Τ-λεμφοκύτταρα που μπορεί να είναι CD4+ ή CD8+, τα HSTL κύτταρα συχνά είναι διπλά αρνητικά.

Gamma Delta (γδ) TCR έκφραση: Σε αρκετές περιπτώσεις, τα HSTL κύτταρα μπορεί να εκφράζουν τον gamma delta (γδ) υπότυπο του Τ-κυτταρικού υποδοχέα (TCR), αντί για τον πιο κοινό alpha beta (αβ) υπότυπο.

Απώλεια του CD5: Η έκφραση του CD5, ενός άλλου Τ-κυτταρικού δείκτη, μπορεί να είναι αρνητική ή ασθενής στα HSTL κύτταρα.

Κυτταρογενετική

Πιο κοινές:

  • Ισοχρωμόσωμα 7q (i(7q)): Αποτελεί την πιο αξιοσημείωτη χρωμοσωμική ανωμαλία που ανευρίσκεται στις περισσότερες περιπτώσεις HSTL. Παρατηρείται όταν ένα ολόκληρο μακρύ σκέλος (q σκέλος) του χρωμοσώματος 7 διπλασιάζεται, οδηγώντας σε ένα επιπλέον αντίγραφο γονιδίων σε αυτήν την περιοχή.
  • Τρισωμία 8: Ένα επιπλέον αντίγραφο του χρωμοσώματος 8 αποτελεί μια άλλη συχνή ανωμαλία που παρατηρείται στ HSTL ασθενείς.

Επίδραση των χρωμοσωμικών αλλαγών:

  • Το διπλασιασμένο γενετικό υλικό στο i(7q) και την τρισωμία 8 πιθανώς συμβάλλει στην ανεξέλεγκτη ανάπτυξη και επιβίωση των παθολογικών Τ κυττάρων στο HSTL.
  • Specific genes located on these chromosomes might play a role in cell cycle regulation, proliferation, or other processes vital for tumor development.

Λοιπές γενετικές μεταβολές:

  • Πρόσφατα ερευνητικά δεδομένα υποδεικνύουν ότι μεταλλάξεις σε συγκεκριμένα γονίδια ενέχονται επίσης στην παθογένεια του HSTL.
  • Γονίδια που σχετίζονται με την αναδιαμόρφωση της χρωματίνης (ρυθμιστικά του DNA packaging) και με το JAK/STAT σηματοδοτικό μονοπάτι (που εμπλέκονται στην κυτταρική ανάπτυξη και επιβίωση) μεταλλάσονται συχνά στο HSTL.

Διαγνωστικός ρόλος:

  • Η κυτταρογενετική ανάλυση που εξετάζει τον αριθμό και τη δομή των χρωμοσωμάτων μπορεί να βοηθήσει στην ταυτοποίηση αυτών των χρωμοσωμικών ανωμαλιών και να υποστηρίξουν τη διάγνωση του HSTL.

Περιορισμοί:

  • Ενώ οι χρωμοσωμικές ανωμαλίες αποτελούν σημαντικό χαρακτηριστικό του HSTL, δεν είναι ειδικές της νόσου και μπορεί να παρατηρηθούν και σε άλλους τύπους λεμφωμάτων.
  • Μία συγκεντρωτική εκτίμηση που θα περιλαμβάνει κλινικά χαρακτηριστικά, εξετάσεις αίματος, απεικονιστικές εξετάσεις και μερικές φορές μοριακές αναλύσεις, είναι απαραίτητη για μια οριστική διάγνωση.

Μοριακή γενετική

TCRγ

AITL

Ανοσοφαινότυπος

Τυπικά εκφράζει CD4, μαζί με τους παν Τ δείκτες CD2, CD3 και CD5. Η έκφραση του CD7 συνήθως χάνεται. Χαρακτηριστικά, τα κακοήθη κύτταρα εμφανίζουν παθολογική έκφραση του CD10, που βοηθά στη διαφοροποίηση αυτής της οντότητας από αντιδραστικά φαινόμενα και από άλλα περιφερικά Τ-λεμφώματα. Βοηθάει, επίσης, στην ανίχνευση των AITL κυττάρων στο περιφερικό αίμα. Τα τελευταία μπορούν να ανιχνευθούν μέχρι και στο 50% υων περιπτώσεων με προσεκτικό έλεγχο.

Κυτταρογενετική

  • Χρωμοσωμικές ανωμαλίες ανιχνεύονται στο 30-50% των περιπτώσεων AITL.
  • Αυτό συνεπάγεται ότι ένα σημαντικό ποσοστό ασθενών με AITL δε θα έχουν κάποια ανιχνεύσιμη χρωμοσωμική βλάβη.

Κοινές ανωμαλίες:

  • Όταν υπάρχουν, οι πιο συχνές χρωμοσωμικές αλλαγές στο AITL περιλαμβάνουν:
    • Τρισωμία: Απόκτηση ολόκληρου χρωμοσώματος, πιο συχνά των χρωμοσωμάτων 3, 5, και Χ.
    • Ελλείψεις: Απώλεια γενετικού υλικού από ένα χρωμόσωμα, αν και λιγότερο συχνές από τις τρισωμίες.
    • Δομικές ανωμαλίες: Αναδιατάξεις στα όρια χρωμοσωμάτων που μπορεί να είναι σύνθετες και να περιέχουν διάφορα χρωμοσώματα.

Ειδικές βλάβες:

  • Απόκτηση χρωμοσώματος 5 (Chr5): Αποτελεί μοναδικό εύρημα που παρατηρείται στο 43% σε κάποιες μελέτες, δυνητικά σχετιζόμενο με μεταλλάξεις στο IDH2R172 γονίδιο.

Κλινική σημασία:

  • Η παρουσία ή απουσία χρωμοσωμικών ανωμαλιών δεν αποτελεί ισχυρό προγνωστικό παράγοντα στο AITL.
  • Άλλοι παράγοντες, όπως το στάδιο της νόσου και το performance status διαδραματίζει πιο σημαντικό ρόλο.

Εναλλακτικές τεχνικές:

  • Καρυότυπος: Αυτή η παραδοσιακή μέθοδος αναλύει τον αριθμό και τη δομή των χρωμοσωμάτων κυττάρων σε μετάφαση. Ενώ παρέχει πληροφορίες, έχει περιορισμούς στην ανίχνευση μικρότερων γενετικών αλλαγών.
  • Fluorescence in situ hybridization (FISH): Η τεχνική αυτή στοχεύει ειδικές περιοχές των χρωμοσωμάτων και μπορεί να ανιχνεύσει αποκτήσεις, απώλειες ή αναδιατάξεις με υψηλότερη ευαισθησία.
  • Array-based comparative genomic hybridization (CGH): Αυτή η προηγμένη τεχνική επιτρέπει μια πιο περιεκτική ανάλυση του συνόλου του γονιδιώματος, προσδιορίζοντας ακόμη και μικρές μεταβολές στον αριθμό αντιγράφων.

Τρέχοντα δεδομένα:

  • Με βάση τα ερευνητικά δεδομένα γενετικές μεταλλάξεις σε γονίδια όπως TET2, DNMT3A,και IDH2,ενδεχομένως διαδραματίζουν πιο σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη του AITL σε σχέση με τις χρωμοσωμικές ανωμαλίες.
  • Η έρευνα εστιάζεται στον προδιορισμό αυτών των μεταλλάξεων για πιθανές στοχευμένες θεραπείες.

Συνολικά:

  • Η χρωμοσωμική ανάλυση αποτελεί χρήσιμο εργαλείο στη διάγνωση του AITL, αλλά δεν αποκαλύπτει πάντοτε ανωμαλίες.
  • Άλλες τεχνικές και ο προσδιορισμός συγκεκριμένων μεταλλάξεων γονιδίων είναι σημαντικές στην κατανόηση και αντιμετώπιση του AITL.