Μεθοδος |
Αντιπηκτικό |
Αναγκαιότητα |
Ανοσοφαινότυπος |
EDTA/Heparin |
Επικουρικός |
Καρυοτυπική Ανάλυση |
Heparin |
Υποχρεωτική |
FISH |
EDTA |
Επικουρική |
Μοριακές |
EDTA/Heparin |
Υποχρεωτικές |
Τα μυελοδυσπλαστικά νεοπλάσματα (MDS, παλαιότερα: μυελοδυσπλαστικά σύνδρομα) είναι επίκτητες κλωνικές ασθένειες του μυελού των οστών που εμφανίζονται κατά προτίμηση σε μεγαλύτερη ηλικία. Τα MDS χαρακτηρίζονται από μια πολλαπλασιαστική και αποπτωτική παθολογία των αιμοποιητικών προγονικών κυττάρων. Ταυτόχρονα, συχνά υπάρχει ένα φλεγμονώδες μικροπεριβάλλον των αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων, που σχετίζεται με αυξανόμενη αστάθεια του γονιδιώματος (Stubbins et al. 2022). Η συνέπεια είναι συχνά αναιμία και επίσης ουδετεροπενία και/ή θρομβοπενία. Σημάδια δυσπλασίας παρατηρούνται σε τουλάχιστον μία από τις τρεις σειρές αιμοποιητικών κυττάρων και συνήθως ανευρίσκεται λευχαιμικός μετασχηματισμός σε ΟΜΛ. Ο γενετικός χαρακτηρισμός παίζει ολοένα και πιο σημαντικό ρόλο στη διάγνωση, κάτι που αντικατοπτρίζεται στη νέα ταξινόμηση του ΠΟΥ που δημοσιεύτηκε το 2022. Σε αυτήν την ταξινόμηση, διακρίνονται πλέον τα "MDS με καθορισμένες γενετικές ανωμαλίες" και "MDS, μορφολογικά καθορισμένα" (WHO 2022):
Ανοσοφαινότυπος
Ο ανοσοφαινοτυπισμός μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση ανώμαλων μοτίβων έκφρασης αντιγόνων τυπικών του MDS. Σε ασθενείς με υποψία ή επιβεβαιωμένο MDS, η πολυπαραμετρική κυτταρομετρία ροής μπορεί να παρέχει πολύτιμες πληροφορίες για τη διάγνωση και επίσης την πρόγνωση. Είναι σε θέση να ανιχνεύσει ανωμαλίες έκφρασης στα κύτταρα της κοκκιοκυτταρικής, της μονοκυτταρικής και των ερυθρών καθώς και στα CD34+, οι οποίες συσχετίζονται με δυσπλασίες (Westers et al. 2012).
Σε συνδυασμό με τα παραπάνω τα διάφρα score μελέτης (πχ Ogata), προσφέρουν ισχυρές διαφοροδοαγνωστικές πληροφορίες.
Καρυότυπος
Η κυτταρογενετική είναι κεντρικής σημασίας στη διάγνωση MDS. Εφόσον η ανάλυση χρωμοσωμάτων απαιτεί κύτταρα ικανά να διαιρούνται, η ανάλυση χρωμοσωμάτων θα πρέπει να πραγματοποιείται από αντιπηκτικό μυελού των οστών με ηπαρίνη. Εάν δεν μπορεί να ληφθεί μυελός των οστών, μπορεί να επιχειρηθεί ανάλυση από περιφερικό αίμα. Ωστόσο, το περιφερικό αίμα συχνά αποτυγχάνει να ανιχνεύσει ή ανιχνεύει μόνο εν μέρει τις χρωμοσωμικές ανωμαλίες που εμφανίζονται στο MDS.
Στην περίπτωση ενός ανώμαλου καρυότυπου, όταν μορφολογικά δεν είναι επιβεβαιωμένη η διάγνωση MDS, αρχικά επιβεβαιώνεται μόνο η κλωνικότητα. Έτσι, υπάρχει κλωνική αιμοποίηση απροσδιόριστου δυναμικού (CHIP) ή σε περίπτωση επίμονης κυτταροπενίας, κλωνική κυτταροπενία απροσδιόριστης σημασίας (CCUS). Επιπλέον, η απώλεια του χρωμοσώματος Υ είναι συχνά μια παρέκκλιση που σχετίζεται με την ηλικία, το ποσοστό της οποίας στα χρωμοσώματα μεταφάσεως φαίνεται να έχει προγνωστική αξία. Σε μια μελέτη, μια απώλεια σε ≥75% των μεταφάσεων οδήγησε σε πιο συχνή κυτταρομορφολογική διάγνωση του MDS ή σε υψηλότερη πιθανότητα ανάπτυξης MDS κατά τη διάρκεια της νόσου. Επιπλέον, παρουσιάστηκε συσχέτιση με μεταλλάξεις που σχετίζονται με το MDS (Ouseph et al. 2021).
Ωστόσο, τα κυτταρογενετικά ευρήματα μπορεί επίσης να καθορίζουν την οντότητα. Η διάγνωση του "MDS-5q" μπορεί επίσης να γίνει παρουσία άλλης κυτταρογενετικής αλλοίωσης, αλλά αυτή δεν πρέπει να είναι μονοσωμία 7 ή διαγραφή 7q. Το "MDS-SF3B1" κυτταρογενετικά δεν εμφανίζει διαγραφή 5q, μονοσωμία 7 ή σύνθετο καρυότυπο. Οι ασθενείς με MDS-biTP53 έχουν συχνά διαγραφές 17p και επίσης σύνθετους καρυότυπους σε >90% των περιπτώσεων (WHO 2022).
Η κυτταρογενετική επιτρέπει επίσης την αξιολόγηση της πρόγνωσης σε ασθενείς με κυτταρομορφολογικά επιβεβαιωμένο MDS (Bernard et al. 2022).
Υποτροπιάζουσες χρωμοσωμικές ανωμαλίες στο MDS, εν μέρει με προγνωστική συνάφεια σύμφωνα με το IPSS-R ή το IPSS-M:
- monosomy 1, 1p loss or 1q gain
- der(1;7)(q10;p10)
- 5q deletion
- monosomy 7 or 7q deletion
- trisomy 8
- 9q deletion
- trisomy 11 or 11q deletion
- 12p deletion or t(12p)
- monosomy 13 or 13q deletion
- 16q deletion
- i(17q) or t(17p) or 17p deletion
- trisomy 19
- 20q deletion
- trisomy 21
- idic(X)(q13)
- Y loss
- complex karyotype (>3 aberrations)
Η προγνωστική σημασία των τυπικών χρωμοσωμικών αλλοιώσεων ταξινομείται σε πέντε ομάδες κυτταρογενετικού κινδύνου στο IPSS-R:
Μοριακή Γενετική
Τα τελευταία χρόνια, έχουν ανακαλυφθεί πολυάριθμες γονιδιακές μεταλλάξεις στο MDS, οι οποίες αποκτούν σημασία για την υποταξινόμηση, την αξιολόγηση κινδύνου και τον χαρακτηρισμό του MDS (Papaemmanuil et al. 2013, Haferlach et al. 2014, Bernard et al. 2022). Επιπλέον, μια μελέτη έδειξε ότι όταν εξετάστηκαν όλα τα γονίδια που κωδικοποιούν πρωτεΐνες, συμπεριλαμβανομένων των παραλλαγών του αριθμού αντιγράφων, όλοι οι ασθενείς είχαν τουλάχιστον μία γενετική αλλοίωση (Makishima et al. 2017), που αντικατοπτρίζει τεράστια πρόοδο στον γενετικό χαρακτηρισμό των ασθενών με MDS. Επίσης στην ταξινόμηση η μοριακή γενετική παίζει σημαντικό ρόλο πλέον (WHO 2022).
Gene |
~Frequency (%) |
Prognosis |
ASXL1* |
17-25 |
unfavorable |
BCOR* |
4-5 |
unfavorable |
BCORL1 |
up to 2 |
neutral |
CBL* |
3-5 |
unfavorable |
CSF3R |
<1 |
neutral |
DNMT3A* |
12-16 |
unfavorable |
ETV6 |
2-4 |
unfavorable |
EZH2 |
5-6 |
unfavorable |
FLT3 |
1 |
unfavorable |
GATA2 |
1 |
not clear |
GNB1 |
1 |
neutral |
IDH1 |
3 |
unfavorable |
IDH2 |
4-5 |
unfavorable |
JAK2 |
3-4 |
not clear |
KMT2A PTD |
2,5 |
unfavorable |
KRAS |
1-3 |
unfavorable |
NF1 |
up to 3 |
unfavorable |
NRAS |
3-4 |
unfavorable |
PHF6 |
1-3 |
unfavorable |
PPMD1 |
up to 2 |
unfavorable |
PRPF8 |
1 |
neutral |
PTPN11 |
up to 2 |
unfavorable |
RAD21 |
up to 4 |
unfavorable |
RUNX1 |
8-13 |
unfavorable |
SETBP1 |
3 |
unfavorable |
SF3B1* |
20-26 |
favorable** |
SMC3 |
<2 |
not relevant |
SRSF2* |
12-16 |
unfavorable |
STAG2 |
3-9 |
unfavorable |
TET2* |
up to 31 |
favorable |
TP53* |
7-16 |
unfavorable*** |
U2AF1* |
7-9 |
contradictory data |
WT1 |
up to 1,5 |
neutral |
ZRSR2 |
6 |
not clear |
*Μεταλλάξεις σε αυτά τα γονίδια συμβαίνουν περιστασιακά και σε αιμοποιητικά αρχέγονα κύτταρα υγιών ανθρώπων (βλ. «Clonal hematopoiesis of undetermined potential (CHIP)") (WHO 2022).
**Η ευνοϊκή πρόγνωση ισχύει μόνο εάν δεν υπάρχει ταυτόχρονη διαγραφή 5q ή μετάλλαξη των BCOR, BCORL1, RUNX1, NRAS, STAG2 ή SRSF2 (Bernard et al. 2022).
***Στη μελέτη IPSS-M του Bernard, μια προγνωστικά δυσμενής επίδραση θα μπορούσε να βρεθεί μόνο με >2 αλλοιώσεις του TP53, γι' αυτό μόνο το TP53multihit (MDS-biTP53) περιλαμβάνεται ως παράγοντας κινδύνου στο IPSS-M.
Τα SF3B1 και TP53 είναι μεταλλάξεις που καθορίζουν την οντότητα. Το MDS-biTP53 ορίζεται από δύο ή περισσότερες μεταλλάξεις TP53, μια μετάλλαξη με αποδεδειγμένη απώλεια αριθμού αντιγράφων TP53 ή απώλεια ετεροζυγωτίας ουδέτερη ως προς τον αριθμό αντιγράφων. Οι μεταλλάξεις του NPM1 θεωρούνται συμβάντα που καθορίζουν την AML σύμφωνα με τη νέα ταξινόμηση του WHO, και ως εκ τούτου περιπτώσεις με χαρακτηριστικά παρόμοια με MDS θα πρέπει επίσης να θεωρούνται AML με μετάλλαξη NPM1 (WHO 2022). Ένας αριθμός άλλων γονιδιακών μεταλλάξεων έχει επίσης βρεθεί στο MDS, αλλά αυτές είναι πολύ σπάνιες (<5%) και επίσης επικαλύπτονται με άλλες ασθένειες και επομένως δεν συζητούνται περαιτέρω εδώ. Μια επισκόπηση των μεταλλάξεων που περιλαμβάνονται στη νέα βαθμολογία κινδύνου IPSS-M μπορεί να βρεθεί στη δημοσίευση (Bernard et al. 2022).